Endonuclease e exonuclease são os dois tipos diferentes de nucleases. São enzimas de restrição endonucleases-Um polímero de DNA é cortado por endonucleases. Nucleotídeos individuais da extremidade de uma fita são removidos por exonucleases. As endonucleases que cortam em certos locais no meio das fitas de DNA são conhecidas como enzimas de restrição.
Em ou perto de seções de reconhecimento específicas dentro de moléculas chamadas sítios de restrição, uma enzima chamada enzima de restrição, muitas vezes referida como uma endonuclease de restrição ou uma restritase, cliva o DNA em fragmentos. As enzimas de restrição são um subconjunto do grupo mais amplo de enzimas endonucleases.
- Que tipo de enzimas são enzimas de restrição?
- Por que são endonucleases chamadas enzimas de restrição?
- Como são as enzimas de restrição das endonucleases?
- Quando as endonucleases são enzimas de restrição?
- Onde as enzimas endonucleases são encontradas?
- Exemplos de endonucleases Enzimas ?
- Todas as enzimas de restrição são endonucleases?
- O que as enzimas de restrição funcionam?
Que tipo de enzimas são enzimas de restrição?
Uma proteína bacteriana isolada conhecida como enzima de restrição cliva o DNA em locais específicos da sequência para criar fragmentos de DNA com uma sequência conhecida em cada extremidade.
As enzimas de corte de DNA que reconhecem locais particulares do DNA são conhecidas como enzimas de restrição. As extremidades produzidas por muitas enzimas de restrição têm uma saliência de fita simples porque fazem cortes escalonados em ou perto de seus locais de reconhecimento. A enzima DNA ligase é capaz de unir duas moléculas de DNA se suas extremidades forem idênticas.
Por que as endonucleases são chamadas de enzimas de restrição?
Endonucleases chamadas de enzimas de restrição. Uma vez que corta a fita de dupla hélice do DNA em locais específicos, também é conhecida como “tesoura molecular”. Essas áreas ou locais são chamados de locais de reconhecimento. Um local de reconhecimento distinto está presente em quase todas as endonucleases de restrição.
Por reconhecerem e cortarem o DNA em locais específicos, as endonucleases de restrição são assim chamadas porque limitam a proliferação de bacteriófagos. As endonucleases de restrição servem aos seguintes propósitos: A sequência de DNA completa é examinada por cada endonuclease para a sequência de reconhecimento palindrômica.
Como são as enzimas de restrição das endonucleases?
Uma proteína bacteriana denominada enzima de restrição, também conhecida como endonuclease de restrição, cliva o DNA em locais específicos ao longo da molécula. As enzimas de restrição clivam o DNA estranho dentro da célula bacteriana, matando os organismos infectados.
Enzimas chamadas endonucleases clivam a ligação fosfodiéster encontrada nas cadeias de polinucleotídeos. Enquanto muitas enzimas de corte de DNA, comumente conhecidas como endonucleases de restrição ou enzimas de restrição, apenas clivam em sequências de nucleotídeos muito específicas, alguns, como a desoxirribonuclease I, cortam o DNA de forma relativamente não específica.
Quando as endonucleases são enzimas de restrição?
As endonucleases conhecidas como enzimas de restrição provêm de eubactérias e archaea e são capazes de detectar uma determinada sequência de DNA. O sítio de restrição é a sequência de nucleotídeos que uma enzima de restrição reconhece para clivagem. Um sítio de restrição consiste tipicamente em uma sequência palindrômica entre quatro e seis nucleotídeos de comprimento.
A endonuclease é uma enzima que divide nucleotídeos diferentes dos dois terminais de uma cadeia polinucleotídica. Os sítios de restrição são regiões da molécula de DNA que contêm certas sequências de nucleotídeos (4-8 pares de bases de comprimento) que as enzimas de restrição podem reconhecer.
Onde as enzimas endonucleases são encontradas?
As enzimas de restrição são endonucleases de eubactérias e archaea que reconhecem uma sequência específica de DNA. Para atingir e eliminar o DNA viral que invadiu suas células, as bactérias produzem endonucleases de restrição.
Ambas as endonucleases de restrição tipo I e tipo II podem clivar o DNA em certas sequências de DNA, porém as endonucleases de restrição tipo II são as que sempre são mantidas em freezers em laboratórios de biologia molecular.
Ambos os extratos nucleares e de tecido foram usados para isolar a enzima de restrição HsaI de embriões humanos, Homo sapiens. Acaba por ser uma enzima única com uma ligação funcional à endonuclease Tipo II.
Exemplos de enzimas endonucleases?
- Enonuclease RecBCD
- Endonuclease T7 (P00641)
- Endonuclease T4 II (P07059)
- Endonuclease Bal 31
- Endonuclease I (endo I; P25736)
- Endonuclease II (endo VI, exo III; P09030)
- Nuclease microcócica
- Endonuclease de Neurospora
- Nuclease P1 (P24289)
- nuclease de feijão mungo I
- S1 nuclease (P24021)
- Nuclease de Ustilago (Dnase I)
- DNAse I (P00639)
- Endonuclease AP
- Endo R
Todas as enzimas de restrição são endonucleases?
Um subconjunto da categoria de enzimas endonuclease maior são as enzimas de restrição. Os cinco tipos diferentes de enzimas de restrição são frequentemente categorizados de acordo com sua estrutura e se clivam o substrato de DNA no local de reconhecimento ou em um local distante.
As endonucleases de restrição, comumente conhecidas como enzimas de restrição, são enzimas que clivam uma molécula de DNA em um determinado local. Elas são instrumentos cruciais para a ciência do DNA recombinante. A enzima procura uma molécula de DNA por uma determinada sequência, normalmente consistindo de quatro a seis nucleotídeos.
Os quatro componentes químicos fundamentais da adenina, citosina, timina e guanina, que compõem a molécula linear de DNA de fita dupla, são reconhecidos por cada enzima de restrição. como uma sequência breve e particular. Essas áreas, que também são conhecidas como sequências de reconhecimento ou sítios de reconhecimento, são dispersas aleatoriamente pelo DNA.
O que as enzimas de restrição funcionam?
Uma bactéria se defende de vírus bacterianos conhecidos como bacteriófagos ou fagos usando uma enzima de restrição. Um fago se replica inserindo seu DNA na célula bacteriana quando infecta uma bactéria.
A sequência de reconhecimento é alterada e protegida da endonuclease por metilases, que adicionam grupos metil (-CH3) às bases de adenina ou citosina. O sistema de uma espécie bacteriana para modificar as restrições é composto pela enzima de restrição e sua metilase correspondente.
Para diversos fins científicos, A manipulação do DNA é feita usando enzimas de restrição isoladas.Eles são empregados em atividades de clonagem de genes e produção de proteínas para auxiliar na inserção de genes em vetores plasmidiais.
Devido à necessidade de evitar limitar o DNA desejado enquanto corta propositalmente as extremidades do DNA, locais de restrição encontrados naturalmente dentro dos genes afetam a escolha da endonuclease para a digestão do DNA. Isso dá flexibilidade ao inserir fragmentos de genes no vetor plasmidial.
Ao identificar seletivamente alterações de base única no DNA chamadas polimorfismos de nucleotídeo único, enzimas de restrição também podem ser utilizadas para diferenciar entre alelos de genes (SNPs). O DNA genômico é digerido usando enzimas de restrição em preparação para análise genética de Southern blot.
Conclusão
restrições enzimas produzidas por várias espécies bacterianas podem detectar várias sequências de nucleotídeos. Ao acelerar a hidrólise da ligação entre nucleotídeos vizinhos, uma endonuclease de restrição que reconhece uma sequência corta a molécula de DNA. Ao ocultar suas sequências de reconhecimento, as bactérias impedem que esse tipo de degradação do DNA ocorra em seu próprio DNA.
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